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熒光蛋白激發(fā)光源的選擇

更新時間:2023-01-03   點擊次數(shù):3015次

熒光蛋白激發(fā)觀測燈的光源選擇

信息摘要:

熒光蛋白激發(fā)觀測燈是用來快速觀察篩選目標(biāo)基因表達的工具,美國路陽生產(chǎn)的熒光蛋白激發(fā)觀測燈能夠觀察綠色熒光蛋白、藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等多種熒光蛋白的表達。面對多種熒光蛋白該如何快速選擇理想的熒光蛋白激發(fā)觀測燈?現(xiàn)在美國路陽中國公司的技術(shù)工程師將選型問題總結(jié)如下:

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熒光蛋白激發(fā)觀測燈是用來快速觀察篩選目標(biāo)基因表達的工具,美國路陽生產(chǎn)的熒光蛋白激發(fā)觀測燈能夠觀察綠色熒光蛋白藍色熒光蛋白黃色熒光蛋白紅色熒光蛋白等多種熒光蛋白的表達。面對多種熒光蛋白該如何快速選擇理想的熒光蛋白激發(fā)觀測燈?現(xiàn)在美國路陽中國公司的技術(shù)工程師將選型問題總結(jié)如下:
熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415系列能夠選擇405nm、450nm、488nm、505nm、530nm等多種波段,每種波段對應(yīng)一種熒光蛋白,根據(jù)自己的熒光蛋白選擇合適的波長

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 R和L波段:

R波段為450nm,L波段為488nm,這2給波段主要用于觀察綠色熒光蛋白。綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,簡稱GFP)應(yīng)該在450nm、365nm、488nm里面選一種,因綠色熒光蛋白有近百種,盡管都是綠色熒光蛋白,但激發(fā)波長從320nm到500nm都有,在選擇激發(fā)觀測燈時,一定要搞清楚具體是哪種綠色熒光蛋白,這種熒光蛋白的激發(fā)主峰在什么波段,有了激發(fā)光譜圖,選擇靠近主峰的波段,就是理想的激發(fā)波長。如果是增強型綠色熒光蛋白,選擇450nm或488nm是理想的。那么選擇LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)觀測燈的R波段,如果是野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),建議選擇365nm波段,推薦使用LUYOR-3410UV便攜式高強度紫外線燈

圖1.綠色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 C波段:

C波段為505nm,主要是用于激發(fā)黃色熒光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)基因的表達。黃色熒光蛋白主要有Citrine, Venus, and Ypet。如果您的載體里面的標(biāo)記基因用的是Citrine, Venus, and Ypet,那么就選擇LUYOR-3415的C波段。


圖2.黃色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 G波段:

G波段為530nm波段,用來激發(fā)和觀察紅色熒光蛋白(Red fluorescent protein,簡稱RFP) 的表達。紅色熒光蛋白常用的有DsRed2,mCherry、mRuby2,tdTomato

圖3.紅色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 V波段:

V波段:為405nm波段,是用來觀察青色熒光蛋白(Cyan Fluorescent Protein簡稱CFP)的表達,青色熒光蛋白激發(fā)波長為405nm,發(fā)射波長為485nm,如果您是用的CFP,那么選擇LUYOR-3415 V波段.

圖4.青色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈 U波段:

U波段:為365nm波段,是用來觀察藍色熒光蛋白(blue Fluorescent Protein簡稱BFP)的表達和 野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),推薦使用LUYOR-3410UV便攜式高強度紫外線燈。

圖1.wtGFP綠色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415出廠時內(nèi)置兩種波段,大家根據(jù)自己常用的熒光蛋白選擇2種,如果您還不是很明白,建議您和美國路陽上海公司的銷售工程師自己溝通。有他們根據(jù)您的需求,幫助您選擇理想的型號。

上圖為:熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415


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